最近研二的师弟在实验室愁眉苦脸。师姐救救我,导师让我检测目标蛋白,但是我不知道做哪个实验……唉!IHC、ELISA、WB,都是常用的实验,今天就来和你说说怎么选择吧~
「WB、IHC、ELISA」如何选择?
免疫组化、Western blot、ELISA,作为实验室最常见三大类实验,分别用于蛋白质的定位,定性和定量。
本篇汇总 3 类研究表格,说明了这几类研究的特点:
(点击下方图片查看更多区别)
更多区别可进入
丁香实验小程序查看
「3 类实验」如何开始准备?
在了解了以上背景后,我们就可以开始准备这些实验啦!
IHC 材料与仪器材料:1. 1xPBS 缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137 mmol/L, KCl2. 7mmol/L,Na2HPO4 4.3 mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。2. CB:柠檬酸三钠 3g, 柠檬酸 0.4g。3. 1% 盐酸酒精分化液:按体积比为浓盐酸:无水乙醇= 1:99 配制。4. NGS:正常山羊血清,10% 及 1% NGS 用 1xPBS 稀释。5. 苏木素染色液:苏木精粉 0.5 g,铵矾 24 g,蒸馏水 70 ml,NaIO 31 g,水 5 ml,再加入甘油 30 ml和冰醋酸 2 ml,混合均匀,滤纸过滤。6. 一抗、二抗按需选择购买,尽量参考高分文献。仪器:烤片机、通风橱、免疫组化染色缸或盒、微波炉、湿盒、显微镜、微波炉。
WB 材料与仪器材料:蛋白质样品、裂解液、PBS、电泳缓冲液、SDS上样缓冲液、转移缓冲液、丽春红染液、TBST、抗体仪器:电泳仪、移液器、脱色摇床、显影仪详细 protocol 也给大家整理好了,按照标准的方法就可以开始实验啦!
ELISA 材料与仪器材料:BSA 血清、碳酸盐缓冲液、PBS、蒸馏水、磷酸枣柠檬酸、四甲基联苯胺仪器:塑料板 ELISA检测仪 加样器 滴头 毛巾 洗涤瓶 烧杯 玻璃棒 试管 吸管 量筒 冰箱 孵育箱